Высокоэффективная жидкостная хроматография
Термин
высокоэффективная жидкостная хроматография
Термин на английском
high performance liquid chromatography
Аббревиатуры
ВЭЖХ, HPLC
Связанные термины
адсорбция, олигопептид, протеомика, сорбент, фуллерен, эндоэдральный, хроматография
Определение
Один из эффективных методов хроматографии для разделения сложных смесей веществ, основанный на различной адсорбционной способности их компонентов по отношению к сорбенту.
Описание
Отличительной особенностью ВЭЖХ от остальных методов жидкостной хроматографии является применение высокого давления при пропускании подвижной фазы через колонку (<250 бар) и микрозернистого сорбента (размер частиц порядка мкм) для разделения вещества в колонке длиной от 2 до 30 см.
В зависимости от механизма разделения различают распределительную, ионообменную, адсорбционную и гель-хроматографию. На практике наибольшую известность приобрела распределительная (обращено-фазовая) хроматография.
Хроматографическое разделение проводят на приборе, называемом хроматографом. Прибор состоит из насосной системы, дозатора для проб, колонки, детектора и устройства для сбора и обработки данных (см. рис. 1).
Насосная система служит для непрерывного пропускания подвижной фазы через колонку. Ввод пробы осуществляется через дозатор (или инжектор), процесс разделения происходит на колонке со специальным сорбентом, как правило, это химически модифицированная поверхность зерен силикагеля.
Графическим представлением результата разделения является хроматограмма, которая представляет собой зависимость сигнала детектора от времени анализа. Каждое вещество изображается в виде пика, площадь которого прямо пропорциональна концентрации вещества в смеси (см. рис. 2).
Авторы
Ссылки
Иллюстрации
Рис. 1. Упрощенная схема хроматографа |
|
Рис. 2. Пример хроматографического разделения смеси белков и пептидов |
Разделы
Аналитические методы (в том числе анализ поверхности)
Главная |